蛋白质检验（蛋白质检验）

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1、蛋白质用双缩脲试剂检测。

2、双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。

3、它是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。

4、会遇到蛋白质显紫色。

5、双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。

6、当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。

7、可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。

8、鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。

9、双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。

10、向试剂中加入碘化钾，会延长试剂的使用寿命。

11、酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。

12、扩展资料注意事项在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。

13、若先加入硫酸铜溶液，再加入氢氧化钠溶液，则无法充分制造碱性环境，此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。

14、配置方法双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液；双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液。

15、先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL，振荡均匀（营造碱性环境），再加入1～2滴双缩脲试剂B，振荡均匀。

16、如果待测液里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。

17、具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。

18、蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。

19、颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

20、参考资料来源：百度百科-双缩脲试剂双缩脲双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成. 双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液； 双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。

21、 双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。

22、 具体方法是： 先将双缩脲试剂A加入组织样液，摇荡均匀（必须营造碱性环境），在加入双缩脲试剂B，摇荡均匀。

23、如果组织里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。

24、具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。

25、蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。

26、颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

27、 双缩脲（NH2CONHCONH2）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。

28、 双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质，与蛋白质接触后的颜色呈紫色。

29、加入双缩脲试剂，发生紫色反应证明有蛋白质存在。

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