昆虫标本制作方法（标本制作方法）

大家好，我是小夏，我来为大家解答以上问题。昆虫标本制作方法，标本制作方法很多人还不知道，现在让我们一起来看看吧！

1、标本制作分很多种：血涂片、植物压片、金相切片等

2、　　举一个组织标本制作的方法

3、　　石蜡切片标本制作法：

4、　　这是最常用的组织学标本的制作方法。这种方法包括以下几个步 骤：取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色和封固。

5、　　1．取材、固定：动物组织在死后及离体后会很快解体，这可能是由于细菌或是由于组织 本身所含酶的分解所致。所以，被检动物在乙醚麻醉下或以不同方法处死后，应立即进行取 材和固定，以停止其分解作用，尽可能保存细胞、组织生前结构和成分，还能抵抗后继各步 骤处理时所产生的影响。 1)取材：即从动物体内取下被检的器官或组织。以肝为例，取材的步骤为：将动物麻醉 或处死后，腹部向上固着在蜡盘上，打开腹部，暴露肝，用锋锐的小剪或手术刀细致而又迅 速地取下一块厚度和大小适宜(0．5cm’)的肝，立即投入固定液内‘：。：

6、　　2)固定：固定是把组织用化学试剂浸泡，使其蛋白质等成分迅速凝固，尽量保持生前形 态结构而不发生死后的变化。固定时所使用的化学溶液，称为固定液。

7、　　常用固定液的配方：

8、　　①Susa液(HeidenhainfsSusafluid) I液： 氯化汞(升汞)饱和水溶液 B液： 氯化钠 三氯醋酸 冰醋酸 40％甲醛 蒸馏水 50．0ml o．58g 2．08g 4．oIml 20．0m1 80．0ml临用时取等量的I液和2液混合后，将组织块投入，固定12h。

9、　　Helly液（Helly`s fluid) 重铬酸钾 2．5g 氯化汞 5．0g 硫酸钠 1．0g 蒸馏水 100．0m1 40％甲醛 5．0m1(临用时加入) 。

10、　　⑧甲醛(10％nelltralformalin) 40％甲醒 10．0m1 蒸馏水 90．0m1。

11、　　④Bouin液(Bouinfsfluid) 苦味酸饱和水溶液 75．0m1 40％甲醛 25．0m1 冰醋5．0m1。

12、　　⑤Carnoy液(Carnoy`s fluid) 无水酒精 6ml 氯仿 3m1 冰醋酸 1m1 。

13、　　2．脱水、透明、浸蜡、包埋：这几个步骤是为了将组织包埋在较硬的物质即石蜡中，以 便于制备薄的切片。

14、　　1)脱水：普通固定液多是水溶液，必须先脱去水分，为浸蜡创造条件。脱水剂通常用酒 精。脱水的步骤是逐步升高酒精溶液的浓度，以去净组织块内的水分，并完全由无水酒精取 代。Susa液固定的组织块，须先入含碘的95％酒精，脱水并洗去组织内的汞沉淀，然后换 90％、95％酒精和无水酒精。10％甲醛液固定后的组织块，脱水时应依次经70％、80％、 90％、95％酒精和无水酒精。

15、　　2)透明：因石蜡不溶于酒精而溶于二甲苯，因而组织块经脱水后须再用二甲苯替代出酒 精。组织块浸入二甲苯后逐渐变得透明，故此步骤称为透明。透明时间依组织块大小及性质 而定。

16、　　3)浸蜡：将透明好的组织块置入已在温箱(56—58℃)内熔化的石蜡内，放置适当时间， 使石蜡浸入组织并替换出二甲苯。

17、　　4)包埋：在包埋器的内壁涂一层甘油，倾入熔化的石蜡，将浸透蜡的组织块放到里面， 摆好方位，挨蜡液表面凝固后，将包埋器投入冷水浴中，使石蜡冷却凝固，即得坚硬的组织 蜡块，经过修整即可用于切片。

18、　　3．切片：一般用轮转式切片机制作组织学切片。切片机一般结构为：切片刀固定台、载 物台(机头或标本固定台)、切片厚度调节装置、机轮等部件。切片时：①将组织蜡块固着在 木托或金属托上，再将蜡块托固定于载物台；⑧将磨好的切片刀固定于切片刀固定台，调好 蜡块与刀的距离；②调整切片厚度调节装置，一般调至切6ym厚度的小格上；④转动机轮，每 转动一周，载物台就向切片刀侧移动6ym，同时还垂直下降上升往返一次，于是切得6ym厚 度的切片一张；如机轮连续转动，就可得一条连续的切片蜡带。

19、　　取下切片，置于涂布一层蛋白甘油的载玻片上，滴上适量水，于酒精灯上徐徐加温，至 切片在水面展平，倾去水，摆好切片位置，放入烤片箱。待切片干燥并牢固地附着于载玻片 后，即可取出，进行染色。

20、　　4．染色、封固：染色的目的是使组织内的不同结构染上不同藏色以便于在显微镜下观察。 染色的方法很多，可根据研究目的选用。组织学和病理学教学标本最常用的基本染色方法是 苏木精·伊红染色(H．E染色)。该方法可将细胞核染成蓝紫色，细鲍质染成粉红色，使细 胞结构对比分明。因此，现将该方法介绍如下。至于在实习过程中遇到的其它特殊染色法，将 分别介绍于首次出现之处。

21、　　苏木精·伊红染色(hematoxylin and eosinstain，简称H．E染色)：

22、　　1)染色的配方：

23、　　①Erich苏木精染液(Ehrlich’shematoxylin) ； 苏木精 2．98 95％酒精 100．0ml 蒸馏水 100．0m1 钾矾 3．0g 冰醋酸 10．0m1 甘油 100．Oml ‘的染液在至气中氧化2个月左右即可使用。

24、　　②1％伊红染液(1％Eosin) 伊红 1．08 蒸馏水 100．0

25、　　2)染色步骤：

26、　　①脱蜡：将裱好的干燥切片放入二甲苯浸2次，每次放置5。10min，以便将石蜡脱净。．

27、　　②下行酒精到水：脱蜡后，切片入无水酒精浸2次，每次2min，以便洗去二甲苯；然后 经95％、90％、80％和70％酒精，每次2min；随后入蒸馏水浸洗。若组织是用含汞的固定液 (如Susa液、Helly液)固定，还须经含碘的70％酒精脱汞后再入70％酒精及蒸馏水。

28、　　②苏木精染色：将蒸馏水浸洗后的切片放入Ehrich苏木精染液中，浸染5一10min。

29、　　④蓝化和分色：切片由染液取出以后，用自来水冲洗，挨切片变成蓝色后，再用稀盐酸 70％酒精溶液进行分色，脱去多余的染料(因为苏木精染色后，往往胞核着色较深，胞质及 结缔组织纤维等亦稍着色，影响下步染色及观察)。然后再用自来水冲洗，使之蓝化，约需15 ~30min。

30、　　⑤伊红染色：切片用蒸馏水浸洗后，放入1％伊红染液，浸染5—10min。

31、　　⑧上行酒精脱水：将切片用蒸馏水洗去附在载玻片上的染液后，经70％、80％、90％95％ 酒精和2次无水酒精脱水，每次一般为2min。：

32、　　⑦透明：切片入二甲苯2次，每次2min。

33、　　⑦封固：从二甲苯中取出切片，在切片的组织上滴加适量树胶(balsam)，上面再加一盖 玻片，使树胶布满于盖玻片与载玻片之间的间隙，封固即告完成。将封好的切片标本放入烤 箱．待盖玻片粘着牢固后，即得可供长期观察和保存的H．E染色标本。

本文到此讲解完毕了，希望对大家有帮助。