苯酚硫酸法测总糖含量的步骤（苯酚硫酸法）

大家好，我是小夏，我来为大家解答以上问题。苯酚硫酸法测总糖含量的步骤，苯酚硫酸法很多人还不知道，现在让我们一起来看看吧！

1、1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。

2、 2．样品含量测定： ①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。

3、最后一次将残渣一起到入离心管。

4、注意：总的溶液不要超出10毫升。

5、（既不要超出离心管的容量）。

6、 ②离心，转速3000转/分钟，共三次。

7、第一次15分钟，取上清液。

8、后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。

9、最后滤液保持18毫升左右。

10、（测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。

11、因为其脂肪含量大容易夹带残渣。

12、） ③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。

13、 ④定容取样。

14、水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。

15、定容至25毫升的容量瓶中。

16、吸取0.2 ml的样品液，以蒸馏补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。

17、每次测定取双样对照。

18、以标准曲线计算多糖含量。

本文到此讲解完毕了，希望对大家有帮助。