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戴安娜临终前的一句话(dan鉴定)
大家好,小珊来为大家解答以上的问题。戴安娜临终前的一句话,dan鉴定这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、1.材料制备0.1g/ml柠檬酸钠100ml500ml烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min离心2min→吸去上清液→活鸡血180ml即得鸡血细胞液(也可将上述烧杯置于冰箱中,静置一天使鸡血细胞自行沉淀)2.方法步骤取血细胞液5-10ml+20ml蒸馏水,玻璃棒沿一个方向快速搅拌(1)提取血细胞核物质纱布过滤,滤液中含dna和其他核物质,如蛋白质原理:血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破,玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂(2)溶解核内dna:滤液+2mol/lnacl溶液40ml,玻璃棒沿一个方向搅拌(3)析出含dna的粘稠物:向上述溶液中缓缓加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向搅拌,出现丝状物,当丝状物不再增加时,停止加水(此时nacl溶液相当于稀释到0.14mol/l)(4)滤取含dna的粘稠物:用多层纱布过滤,含dna的粘稠物留在纱布上(5)dna粘稠物再溶解:20ml2mol/lnacl溶液50ml烧杯,上述粘稠物缓慢搅拌3min(6)过滤含dna的2mol/lnacl溶液:用2层纱布过滤,滤液中含dna(7)提取含杂质较少的dna:上述溶液+95%酒精,缓慢搅拌,出现乳白色丝状物,用玻璃棒将丝装物卷起。
2、(8)dna鉴定:实验关键:本实验成功的关键是获取较纯净的dna,因此应注意:1.充分搅拌鸡血细胞液。
3、dna存在于鸡血细胞核中。
4、将鸡血细胞与蒸馏水混合以后,应用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使血细胞加速破裂,并释放出dna2.沉淀dna必须用冷酒精。
5、实验前必须准备好大量95%的酒精,并在冰箱中(5℃以下)至少存放24小时。
6、3.正确搅拌含有悬浮物的溶液。
7、在第(3)、(5)步骤,玻璃棒不要直插烧杯底部,且搅拌要轻缓,以便获得较完整的dna分子。
8、在步骤(7),要将玻璃棒插入烧杯溶液中间,用手缓慢转动5-10min。
9、你是说DNA的提取方法么?现在正在做这方面试验,希望能帮得上你1)研磨:取样少许置入1.5ml离心管中,以移液枪加入消化缓冲液600μl,冲入液氮或少许石英砂研磨至澄清。
10、2)水浴:水浴温度55℃,水浴时间3-5h左右3)酚抽提:每支离心管中加入600μlTris饱和酚,轻柔的摇晃使固液混合充分。
11、离心机4℃,8000r/min离心10min,以移液枪小心的将上清液取出至新管,重复步骤一次4)Cl抽提:向抽提出的上清液中加入等体积的Cl液,轻柔的摇晃使充分混匀,高速冷冻离心机4℃,10000r/min离心10min,以液枪小心的将上清液取出。
12、5)DNA沉淀:向抽提的上清液中加入2倍体积的无水乙醇,并轻柔的摇晃使溶液充分,再置于-20℃冰箱中保存10min后高速冷冻离心机4℃,12000r/min离心5min,小心倾去乙醇,可见DNA沉淀物。
13、6)DNA洗涤:向在留有DNA沉淀物的离心管中加入-20℃冰箱中保存的70%乙醇500μl,后离心机4℃,12000r/min离心5min,小心倾去乙醇后可见离心管底白色小圆片状的DNA提取物。
14、将离心管倒置于无菌室内室温至干燥。
15、7)DNA溶解:向干燥好的DNA提取物中加入30μl去离子水,4℃冰箱保存。
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