rtpcr和pcr的区别(rtpcr)
大家好,我是小夏,我来为大家解答以上问题。rtpcr和pcr的区别,rtpcr很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。
该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。
RT- PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)即逆转录PCR,是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。
首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。
作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染。
用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA,三种都可。
扩展资料
反转录酶的选择
1、Money 鼠白血病病毒(MMLV)反转录酶:有强的聚合酶活性,RNA酶H活性相对较弱。最适作用温度为37℃。
2、禽成髓细胞瘤病毒(AMV)反转录酶:有强的聚合酶活性和RNA酶H活性。最适作用温度为42℃。
3、Thermus thermophilus、Thermus flavus等嗜热微生物的热稳定性反转录酶:在Mn存在下,允许高温反转录RNA,以消除RNA模板的二级结构。
4、MMLV反转录酶的RNase H突变体:商品名为SuperScript 和SuperScriptⅡ。此种酶较其它酶能多将更大部分的RNA转换成cDNA,这一特性允许从含二级结构的、低温反转录很困难的mRNA模板合成较长cDNA。
参考资料:百度百科——RT -PCR
本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。
免责声明:本文由用户上传,与本网站立场无关。财经信息仅供读者参考,并不构成投资建议。投资者据此操作,风险自担。 如有侵权请联系删除!
-
试驾极狐阿尔法S(ARCFOX αS)是一次令人印象深刻的体验。从咨询开始,品牌的专业客服迅速回应了我的疑问,...浏览全文>>
-
如果您想预约哈弗猛龙的试驾体验,可以按照以下步骤快速在4S店完成预约:首先,您可以通过哈弗汽车的官方网站...浏览全文>>
-
如果您想体验零跑汽车的试驾服务,可以通过以下步骤在4S店快速预约:首先,访问零跑汽车的官方网站或通过其官...浏览全文>>
-
试驾奔驰迈巴赫S级的预约流程简单清晰,以下是具体步骤:首先,访问奔驰官方网站或联系当地授权经销商。在网站...浏览全文>>
-
纳米01试驾流程通常包括以下几个步骤:第一步:预约试驾用户可以通过品牌官网、4S店或电话预约试驾。提前预约...浏览全文>>
-
奔腾B70是一款集时尚设计与卓越性能于一身的中型轿车,近期有幸对其进行了一次深度试驾。这款车型不仅外观大气...浏览全文>>
-
想要快速预约福特蒙迪欧的试驾体验驾驶乐趣?以下是一些简单步骤帮助您轻松完成:首先,访问福特官网或通过福...浏览全文>>
-
大众试驾,轻松搞定试驾想要深入了解一款车的性能与驾驶感受?试驾是最佳选择!无论是追求操控感的运动型轿车...浏览全文>>
-
试驾现代胜达时,您需要满足一些基本条件以确保安全和顺利的体验。首先,您必须持有有效的驾驶证,并且驾龄通...浏览全文>>
-
小鹏G7是一款备受关注的智能电动车,对于新手来说,试驾前需要了解一些关键步骤和注意事项,确保安全且充分体...浏览全文>>
- 哈弗猛龙预约试驾,如何在4S店快速预约?
- 零跑汽车试驾,如何在4S店快速预约?
- 江淮iEV7试驾预约预约流程
- 试驾MG4 EV全攻略
- 奥迪SQ5 Sportback预约试驾,线上+线下操作指南
- 全顺试驾预约,一键搞定,开启豪华驾驶之旅
- 魏牌预约试驾全攻略
- 试驾零跑汽车零跑C01,畅享豪华驾乘,体验卓越性能
- 试驾哈弗H6操作指南
- 零跑T03试驾,畅享豪华驾乘,体验卓越性能
- 菱势汽车预约试驾,轻松搞定试驾流程
- MINI试驾,线上+线下操作指南
- 试驾沃尔沃XC60,从预约到试驾的完美旅程
- 试驾QQ多米,畅享豪华驾乘,体验卓越性能
- 试驾丰田汉兰达,一键搞定,开启豪华驾驶之旅
- 力帆预约试驾,一键搞定,开启豪华驾驶之旅
- 阿维塔12预约试驾,4S店体验全攻略
- 试驾江铃E路顺V6,简单几步,开启完美试驾之旅
- 灵悉L试驾预约,如何享受4S店的专业服务?
- 极氪7X试驾,如何享受4S店的专业服务?