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石蜡切片怎么保存(石蜡切片)

导读 大家好,我是小夏,我来为大家解答以上问题。石蜡切片怎么保存,石蜡切片很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、肠道的石蜡切片的制...

大家好,我是小夏,我来为大家解答以上问题。石蜡切片怎么保存,石蜡切片很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、肠道的石蜡切片的制作

2、(1) 取材:用锋利的刀切取罗非鱼的一小段前肠(据胃5cm左右位置的前肠),组织块的规格为 3~5mm×3~5mm×10~15mm。

3、(2) 固定:采用Bouin氏固定液装瓶固定,固定液用量一般为组织块体积的10~20倍。

4、(3) 冲洗:固定12~24h后,将材料自固定液中取出后,在70%酒精中换洗几次,可在酒精中加几滴氨水至洗去黄色为止。

5、(4) 脱水:70%酒精(1h)→80%酒精(1h)→90%酒精(1h)→95%酒精(1h)→无水乙醇Ⅰ(1h)→无水乙醇Ⅱ(1h)

6、(5) 透明:无水乙醇与二甲苯溶液(1:1)(1h)→二甲苯Ⅰ(1h)→二甲苯Ⅱ

7、 (1h)

8、(6) 浸蜡:浸蜡的全过程应在恒温设备中进行,将恒温箱调至58℃。

9、 二甲苯与石蜡混合液(1:1)(1h)→石蜡Ⅰ(1h)→石蜡Ⅱ(1h)

10、 浸蜡必须彻底,否则组织内残留透明剂会造成切片过程的困难和影响切片

11、 的质量。

12、(7) 包埋:在小纸盒内注入溶化的石蜡,将已浸蜡的组织块置入其内,使蜡块迅速冷却硬固,组织块在蜡块中可长期保存。

13、(8) 切片:包埋后的组织块经修整后,用切片机切成5~7μm的石蜡带。

14、(9) 粘片:将组织石蜡带在50摄氏度的温水中展片,然后用经1%HCl溶液处理干净的载玻片捞片,组织带即可粘在载玻片上。

15、(10) 烤片:将粘好的载玻片置于35℃左右的温箱中烤干,待2~3小时后,即可取下编号。

16、(11) 苏木精—伊红染色:将烤干的片进行染色。

17、①脱蜡:将烤干的切片放入二甲苯(I)10min→二甲苯(Ⅱ)10rain。

18、②复水:将脱蜡后的切片移入100%酒精5min→95%酒精5min→85%酒精5min→70%酒精5min→蒸馏水5min

19、③HE染色显示肠道黏膜上皮内淋巴细胞:将蒸馏水洗涤后的切片移入Harris苏木精液中,10min,使细胞核着色;用自来水洗去切片上残余染液;用1%的盐酸酒精分色3秒;用自来水浸洗3h,显微镜下观察,直到胞核蓝化为止;然后切片入曙红溶液中染色5min,使细胞质着色。经95%酒精与100%酒精脱水,二甲苯透明后,中性树胶封片。

20、④奥新兰一沙黄染色显示肠道内肥大细胞:切片常规脱蜡下行至蒸馏水→奥新兰一沙黄液染色15~20min→蒸馏水速洗,镜检→95%和100%酒精分色脱水1—2min→二甲苯透明→中性树胶封片。

21、⑤阿利新兰醋酸染色显示肠道内杯状细胞:切片经脱蜡下行入蒸馏水→阿利新兰醋酸染色10min→蒸馏水洗→1%高碘酸水液氧化5min→蒸馏水略洗一Schiff试剂染色(37℃恒温箱)30min→普通水洗3次→蒸馏水2min→Ehrlich苏木精染色5min→95%酒精和100%酒精脱水→二甲苯透明,中性树胶封片。

22、切片经脱蜡下行入水:二甲苯(30 min)一二甲苯(10 min)一无水乙醇(5 min)一无水乙醇(5 min)一

23、95% 乙醇(5 min)一85%乙醇(5 min)一70% 乙醇(5 min)一流水冲洗(20 min)。人Ehrlich苏木精染

24、色12 min,蒸馏水速洗。盐酸酒精分色,镜检控制时间。入伊红染色2 min,蒸馏水略洗。盐酸酒精分色,镜检控制时间。经95%酒精与无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。

25、阿利新兰—番红复合染色液的方法称Scaba法

26、阿利新兰—番红分别染色的方法称Spicer法

本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。