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双缩脲反应方程式(双缩脲反应)

导读 大家好,我是小夏,我来为大家解答以上问题。双缩脲反应方程式,双缩脲反应很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、双缩脲试剂 双缩...

大家好,我是小夏,我来为大家解答以上问题。双缩脲反应方程式,双缩脲反应很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、双缩脲试剂 双缩脲反应产物 双缩脲结构双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成. 双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液; 双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。

2、 双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。

3、 具体方法是: 先将双缩脲试剂A加入组织样液,摇荡均匀(必须营造碱性环境),再加入双缩脲试剂B,摇荡均匀。

4、如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。

5、具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。

6、蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。

7、颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

8、 双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。

9、 双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质,与蛋白质接触后的颜色呈紫色。

10、 双缩脲反应 紫色络合物分子结构式 在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与铜离子(Cu2+)作用,形成紫色络合物(该物质的分子结构式见图),该反应即双缩脲反应。

11、 双缩脲反应是肽和蛋白质所特有的,而为氨基酸所没有的一种颜色反应。

12、一般分子中含有两个氨基甲酪基(即肽键:-CO-NH-)的化合物与碱性 铜溶液作用,就会形成紫色或蓝紫色络合物。

13、 注:除-CO-NH-有此反应外,(-CONH2-)、(-CH2-)、(-NH2-)、(-CS-CS-NH2)等基团亦有此反应。

14、 双缩脲反应的应用 蛋白质鉴定 由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应,且颜色深浅与蛋白质的含量的关系在一定范围内符合比尔定律,而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关,故可用双缩脲法测定蛋白质的含量(借助分光光度计可减小误差)。

15、 双缩脲反应主要涉及肽键,因此受蛋白质特异性影响较小。

16、且使用试剂价廉易得,操作简便,可测定的范围为1~10mg蛋白质,适于精度要求不太高的蛋白质含量的测定,能测出的蛋白质含量须在约0.5mg以上。

17、双缩脲法的缺点是精确度低、所需样品量大。

18、干扰此测定的物质包括在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。

本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。