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巢式pcr优点(巢式pcr)

导读 大家好,我是小夏,我来为大家解答以上问题。巢式pcr优点,巢式pcr很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、巢式PCR(nest PCR),使...

大家好,我是小夏,我来为大家解答以上问题。巢式pcr优点,巢式pcr很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、巢式PCR(nest PCR),使用两对引物对目的基因进行扩增的一种PCR技术。首先在该基因起始密码子上游数百bp和终止密码子下游数百bp位置设置一对引物,这对引物由于可操控性大,可以将Tm值,引物结构等设置到最佳。或者可以通过软件自动分析,由机器给出引物序列。然后再在目的基因的准确位置设计第二对引物。

2、在进行PCR时,先用第一对引物进行扩增,扩增后跑胶检测,如果此时跑胶已经可以检测出较好的条带,可以进行回收纯化,再将回收产物作为模板,用第二对引物进行第二轮扩增。如果第一轮产物跑胶时看不清楚条带,则可以将产物适当稀释,以此作为第二轮的模板进行扩增,一般在第一轮以低拷贝量存在的DNA通过第二轮的扩增都可以成功获得的。祝你成功。

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